當(dāng)移液量程從 0.2 到 5 μL 時(shí)，移液準(zhǔn)確度和精密度至關(guān)重要，因此良好的移液技術(shù)至關(guān)重要，因?yàn)樾×砍虝r(shí)處理錯(cuò)誤更加明顯。

隨著越來(lái)越多的重點(diǎn)放在降低試劑和成本上，對(duì)較小量程的需求量很大，例如用于制備 PCR Mastermix 或酶反應(yīng)。但是，移取 0.2 – 5 μL 的小量程對(duì)移液準(zhǔn)確度和精密度提出了新的挑戰(zhàn)。以下幾點(diǎn)是必不可少的：

移液器和吸頭尺寸：始終選擇標(biāo)稱量程盡可能小且吸頭最小的移液器，以使氣墊盡可能小。例如，當(dāng)移取 1 μL 時(shí)，選擇 0.25 – 2.5 μL 移液器和匹配的吸頭，而不是 1 – 10 μL 移液器。

校準(zhǔn)和維護(hù)：正確校準(zhǔn)和維護(hù)移液器至關(guān)重要。移液器上的小調(diào)整和損壞的部件會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)和隨機(jī)誤差值的大量增加。根據(jù) ISO 8655 必須每年進(jìn)行一次校準(zhǔn)。

容積式移液器：檢查您的實(shí)驗(yàn)室中是否有容積范圍較小的容積式移液器。一般來(lái)說(shuō)，使用這種類型的移液器在準(zhǔn)確度和精確度方面比使用經(jīng)典氣墊移液器的移液結(jié)果更好。

嘗試使用更大的量程：您可以考慮稀釋樣品以在最終反應(yīng)中以相同的數(shù)量吸取更大的量程。這可以減少樣品量程非常小的移液錯(cuò)誤。

除了好的工具外，研究人員還必須具備非常好的移液技術(shù)。請(qǐng)?zhí)貏e注意以下步驟：

吸頭連接：請(qǐng)勿將移液器卡在吸頭上，因?yàn)檫@可能會(huì)損壞精細(xì)的吸頭端，導(dǎo)致液體束重新定向或損壞孔口。僅在連接吸頭時(shí)施加輕微壓力，并使用帶有彈簧式吸頭錐的移液器。

握持移液器：在等待離心機(jī)、循環(huán)儀等時(shí)，請(qǐng)勿將移液器握在手中。移液器內(nèi)部會(huì)發(fā)熱并導(dǎo)致氣墊膨脹，導(dǎo)致移液時(shí)與設(shè)定的量程發(fā)生偏差。

預(yù)潤(rùn)濕：吸頭和移液器內(nèi)的空氣加濕使吸頭為樣品做好準(zhǔn)備，并避免在吸取轉(zhuǎn)移量程時(shí)蒸發(fā)。

垂直抽吸：這在處理小量程時(shí)非常重要，以避免移液器傾斜時(shí)發(fā)生的毛細(xì)管效應(yīng)。

浸入深度：盡可能少地浸入吸頭，以防止液體由于毛細(xì)管效應(yīng)進(jìn)入吸頭。經(jīng)驗(yàn)法則：尖端和量程越小，浸入深度越低。移液小量程時(shí)，我們建議最大為 2 mm。

以 45° 角分液：當(dāng)移液器保持在 45° 角時(shí)，可以保證液體的最佳流出。

與容器壁或液體表面接觸：只有當(dāng)尖端緊貼容器壁或浸入液體中時(shí)，才能正確分配小量程。即使是尖端的最后一滴也可以準(zhǔn)確分配。

吹出：在分配少量液體后必須吹出，以分配尖端中存在的最后一滴液體。吹掃也應(yīng)靠著容器壁進(jìn)行。在液面吹氣時(shí)，注意不要將氣泡帶入樣品中。