什么是凍存管（冷凍管）？

凍存管是小型帶蓋圓柱形容器，設(shè)計(jì)用于在超低溫下儲(chǔ)存和保存樣品。盡管傳統(tǒng)上這些小瓶是由玻璃制成的，但出于方便和成本原因，現(xiàn)在它們更常見地由聚丙烯制成。冷凍管經(jīng)過精心設(shè)計(jì)，可承受低至 -196℃ 的溫度，并可容納多種細(xì)胞類型。這些范圍從診斷干細(xì)胞、微生物、原代細(xì)胞到已建立的細(xì)胞系。除此之外，還可能存在儲(chǔ)存在低溫儲(chǔ)存瓶?jī)?nèi)的小型多細(xì)胞生物，以及需要在低溫儲(chǔ)存溫度水平下儲(chǔ)存的核酸和蛋白質(zhì)。

凍存管有各種不同的形式，找到滿足您所有需求的正確類型將確保您保持樣品完整性而無需支付過多費(fèi)用。閱讀我們的文章，詳細(xì)了解為您的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用選擇合適的冷凍管時(shí)的關(guān)鍵購買注意事項(xiàng)。

需要考慮的凍存管的特性

外旋與內(nèi)旋

人們經(jīng)常根據(jù)個(gè)人喜好做出這種選擇，但實(shí)際上這兩種類型的線程之間存在需要考慮的關(guān)鍵功能差異。

許多實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常選擇內(nèi)旋凍存管，以最大限度地減少試管存儲(chǔ)空間，以便更好地裝入冷凍箱中。盡管如此，您可能會(huì)認(rèn)為外螺紋選項(xiàng)是您更好的選擇。它們被認(rèn)為具有較低的污染風(fēng)險(xiǎn)，因?yàn)槠湓O(shè)計(jì)使得除樣品之外的任何東西都更難進(jìn)入小瓶。

外旋冷凍管通常更適合基因組應(yīng)用，但任一選項(xiàng)都被認(rèn)為適合生物樣本庫和其他高通量應(yīng)用。

關(guān)于螺紋要考慮的最后一件事 - 如果您的實(shí)驗(yàn)室使用自動(dòng)化，您可能需要考慮儀器夾具可以使用什么螺紋。

存儲(chǔ)量

冷凍管有多種尺寸可供選擇，可以滿足大多數(shù)需求，但容量大多在 1 mL 到 5 mL 之間。

關(guān)鍵是要確保您的冷凍管沒有裝得太滿，并且有額外的空間，以防樣品在冷凍時(shí)膨脹。實(shí)際上，這意味著實(shí)驗(yàn)室在儲(chǔ)存懸浮在冷凍保護(hù)劑中的 0.5 mL 細(xì)胞樣品時(shí)選擇 1 mL 小瓶，在儲(chǔ)存 1.0 mL 樣品時(shí)選擇 2.0 mL 小瓶。不要裝得太滿的另一個(gè)技巧是使用帶有刻度標(biāo)記的冷凍管，這將確保防止任何可能導(dǎo)致破裂或泄漏的膨脹。

螺旋蓋與翻蓋

您選擇的頂部類型主要取決于您是否使用液相氮。如果是，那么您將需要螺旋蓋冷凍管。這可確保它們不會(huì)因操作不當(dāng)或溫度變化而意外打開。此外，螺旋蓋可以更輕松地從低溫盒中取出并更有效地存儲(chǔ)。

但是，如果您不使用液氮并且需要更方便且更容易打開的頂部，那么翻蓋是更好的選擇。這將為您節(jié)省大量時(shí)間，因?yàn)樗菀状蜷_，這在吞吐量較高的操作和使用批處理的操作中特別有用。

密封安全

確保安全密封的最佳方法是確保您的冷凍瓶蓋和瓶子均由相同材料制成。這將確保它們同步收縮和擴(kuò)展。如果它們使用不同的材料制成，那么隨著溫度的變化，它們將以不同的速率收縮和膨脹，從而導(dǎo)致間隙和潛在的泄漏以及隨之而來的污染。

一些公司提供雙墊圈和法蘭，以在外螺紋冷凍管上提供最高水平的樣品安全性。O 形圈冷凍管被認(rèn)為是最可靠的內(nèi)螺紋冷凍管。

玻璃與塑料

為了安全和方便，許多實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)在使用塑料（通常是聚丙烯）代替可熱封的玻璃安瓿。玻璃安瓿現(xiàn)在被認(rèn)為是過時(shí)的選擇，因?yàn)樵诿芊膺^程中可能會(huì)出現(xiàn)看不見的針孔泄漏，在液氮中儲(chǔ)存后解凍時(shí)可能會(huì)導(dǎo)致它們爆炸。它們也不適合現(xiàn)代標(biāo)簽技術(shù)，而現(xiàn)代標(biāo)簽技術(shù)是確保樣品可追溯性的關(guān)鍵。

自立式與圓底

冷凍管有星形底部的自立式或圓形底部?jī)煞N。如果您需要將小瓶放置在表面上，請(qǐng)務(wù)必選擇自立式

可追溯性和樣品追蹤

低溫儲(chǔ)存的這一領(lǐng)域經(jīng)常被忽視，但樣品跟蹤和可追溯性是需要考慮的一個(gè)重要方面。低溫樣本可以保存多年，在此期間工作人員可能會(huì)發(fā)生變化，如果沒有適當(dāng)維護(hù)記錄，它們可能會(huì)變得無法識(shí)別。

確保選擇盡可能容易識(shí)別樣品的小瓶。您應(yīng)該注意的事項(xiàng)包括：

  ● 大的書寫區(qū)域可記錄足夠的詳細(xì)信息，以便在小瓶位于不正確的位置時(shí)可以找到記錄 - 通常細(xì)胞身份、凍結(jié)日期和負(fù)責(zé)人的姓名縮寫就足夠了。

  ● 條形碼有助于樣品管理和跟蹤系統(tǒng)

  ● 彩色帽子

未來的注意事項(xiàng) - 超耐寒芯片正在開發(fā)中，當(dāng)安裝在單個(gè)冷凍管中時(shí)，可能會(huì)存儲(chǔ)詳細(xì)的熱歷史以及詳細(xì)的批次信息、測(cè)試結(jié)果和其他相關(guān)質(zhì)量文檔。

除了考慮可用的凍存管的不同規(guī)格外，還需要考慮在液氮中儲(chǔ)存凍存管的技術(shù)流程。

儲(chǔ)存溫度

樣品低溫儲(chǔ)存有多種儲(chǔ)存方法，每種方法都在特定溫度下運(yùn)行。選項(xiàng)及其運(yùn)行溫度包括：

液相LN2：保持溫度-196℃

氣相 LN2：能夠在 -135°C 至 -190°C 之間的特定溫度范圍內(nèi)運(yùn)行，具體取決于型號(hào)。

氮蒸氣冷凍機(jī)：-20°C 至 -150°C

儲(chǔ)存的細(xì)胞類型和研究人員首選的儲(chǔ)存方法將決定您的實(shí)驗(yàn)室使用三種可用選項(xiàng)中的哪一種。

然而，由于采用的溫度極低，并非所有管子或設(shè)計(jì)都適合或安全。材料在極低的溫度下會(huì)變得非常脆，使用不適合在您選擇的溫度下使用的小瓶可能會(huì)導(dǎo)致容器在儲(chǔ)存或解凍過程中破碎或破裂。

請(qǐng)仔細(xì)檢查制造商關(guān)于正確使用的建議，因?yàn)橐恍┑蜏仄窟m用于低至 -175°C 的溫度，一些 -150°C，另一些僅適合 80°C。

還值得注意的是，許多制造商聲稱他們的低溫小瓶不適合浸入液相中。如果這些小瓶在回到室溫時(shí)以液相儲(chǔ)存，則這些小瓶或其瓶蓋密封件可能會(huì)由于小泄漏引起的壓力快速積聚而破裂。

如果要將細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮液相中，請(qǐng)考慮將細(xì)胞儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)牡蜏匦∑恐校⒃?Cryoflex 管中熱密封，或?qū)⒓?xì)胞儲(chǔ)存在密封的玻璃安瓿中。

無菌和監(jiān)管要求

臨床樣品和一些放大過程可能在儲(chǔ)存和灌裝過程中受到污染。根據(jù) ISO 1137 選擇 10-6 級(jí)的無菌保證伽馬射線照射，以確保絕對(duì)無菌。內(nèi)螺紋小瓶更適合防止灌裝過程中的污染。

任何用于保存用于人類治療的細(xì)胞的凍存管都需要滿足任何額外的監(jiān)管要求，包括不存在生物活性浸出物和其他顆粒以及儲(chǔ)存期間的封閉完整性。