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如何在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)細(xì)菌

來(lái)源： | 發(fā)布日期：2023-05-22 | 瀏覽量：1

一、準(zhǔn)備培養(yǎng)皿

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準(zhǔn)備瓊脂。 瓊脂是一種用于培養(yǎng)細(xì)菌的果凍狀物質(zhì)。它由一種紅藻制成，為許多不同類型的細(xì)菌提供了理想的生長(zhǎng)表面。某些類型的瓊脂含有添加的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（如羊血等），有助于促進(jìn)更旺盛的細(xì)菌生長(zhǎng)。

本實(shí)驗(yàn)中最容易使用的瓊脂類型是粉末狀的營(yíng)養(yǎng)瓊脂。您將需要多少瓊脂，但每 10 厘米（3.9 英寸）培養(yǎng)皿所用的瓊脂粉不要少于 1.2 克（? 茶匙）。
在耐熱盤或碗中，將 1.2 克（? 茶匙）營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉加入 60 毫升（0.25 攝氏度）熱水中。將這些數(shù)量乘以您計(jì)劃使用的培養(yǎng)皿數(shù)量。
將碗或盤子放入微波爐中，讓它開始沸騰 1 分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，注意確保瓊脂溶液不會(huì)沸騰溢出。
溶液準(zhǔn)備好后，瓊脂粉應(yīng)完全溶解，液體顏色澄清。
在繼續(xù)之前讓瓊脂溶液冷卻幾分鐘。你不想被燒傷！

準(zhǔn)備培養(yǎng)皿

準(zhǔn)備培養(yǎng)皿。 培養(yǎng)皿是由透明玻璃或塑料制成的小型平底容器。它們有兩半 - 頂部和底部 - 相互插入。這可以保護(hù)內(nèi)容物免受任何不需要的污染空氣的影響，但也可以讓細(xì)菌產(chǎn)生的任何氣體逸出。

培養(yǎng)皿在用于培養(yǎng)細(xì)菌前必須徹底滅菌，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。新購(gòu)買的培養(yǎng)皿應(yīng)預(yù)先消毒并密封在塑料包裝中。
從包裝中取出培養(yǎng)皿并將兩半分開。非常小心地將溫?zé)岬沫傊芤旱谷肱囵B(yǎng)皿的下半部分——?jiǎng)偤米阋栽谂囵B(yǎng)皿底部形成一層。在有高火焰的蠟燭或本生燈的情況下工作，以保持較低的污染。
快速更換培養(yǎng)皿的上半部分，以防止空氣中的細(xì)菌污染實(shí)驗(yàn)。將培養(yǎng)皿放在一邊 30 分鐘到 2 小時(shí)，直到瓊脂溶液冷卻并變硬（準(zhǔn)備就緒后它會(huì)像凝固的果凍）。

冷藏培養(yǎng)皿

冷藏培養(yǎng)皿直到可以使用。 如果您不打算立即使用裝滿瓊脂的培養(yǎng)皿，則應(yīng)將它們存放在冰箱中，直到您準(zhǔn)備好繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

將培養(yǎng)皿存放在冰箱中可防止培養(yǎng)皿中的水分蒸發(fā)（細(xì)菌需要潮濕的環(huán)境才能生長(zhǎng)）。它還可以使瓊脂表面稍微變硬，從而防止在轉(zhuǎn)移細(xì)菌樣品時(shí)出現(xiàn)任何撕裂或挖痕。
將培養(yǎng)皿放入冰箱時(shí)，應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置。這有助于防止蓋子上的任何冷凝水掉落并破壞生長(zhǎng)表面。
充滿瓊脂的培養(yǎng)皿可在冰箱中保存長(zhǎng)達(dá)幾個(gè)月。當(dāng)您準(zhǔn)備好使用它們時(shí)，將它們從冰箱中取出并讓它們達(dá)到室溫，然后再放入您的樣品。

二、生長(zhǎng)細(xì)菌

將細(xì)菌引入培養(yǎng)皿中

將細(xì)菌引入培養(yǎng)皿中。 一旦瓊脂溶液變硬并且培養(yǎng)皿處于室溫，您就可以開始有趣的部分了——引入細(xì)菌。有幾種方法可以做到這一點(diǎn)——通過(guò)直接接觸或通過(guò)樣本采集。

直接接觸： 這是指細(xì)菌通過(guò)直接接觸轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿中，即接觸瓊脂。最常見(jiàn)的方法之一是用指尖（洗手之前或之后）輕輕按壓瓊脂表面。但是，您也可以嘗試將指甲或舊硬幣的表面壓入瓊脂中，甚至將一小撮頭發(fā)或一滴牛奶放入培養(yǎng)皿中。如果有的話，請(qǐng)使用無(wú)菌棉簽。動(dòng)用你的想象力！
樣品采集 ：使用這種方法，您可以從幾乎任何表面采集細(xì)菌并將其轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿中，您只需要一些干凈的棉簽。只需拿起棉簽并在您能想到的任何表面上輕掃 - 嘴巴內(nèi)部、門把手、計(jì)算機(jī)鍵盤上的按鍵或遙控器的按鈕 - 然后用它在表面劃線瓊脂（不撕裂）。這些地方藏有大量細(xì)菌，應(yīng)該會(huì)在幾天內(nèi)提供一些有趣（和惡心）的結(jié)果。
如果愿意，您可以在每個(gè)培養(yǎng)皿中放置多個(gè)細(xì)菌樣本——您所需要做的就是將培養(yǎng)皿分成象限（四分之一），然后在每個(gè)象限中涂抹不同的細(xì)菌樣本。
建議您保留培養(yǎng)皿的一個(gè)象限沒(méi)有細(xì)菌樣本以用作對(duì)照組。這使您可以知道在引入細(xì)菌樣品之前瓊脂是否已被污染。

標(biāo)記并密封培養(yǎng)皿

標(biāo)記并密封培養(yǎng)皿。 一旦你引入了細(xì)菌，你應(yīng)該蓋上培養(yǎng)皿的蓋子并用一些封口膜或保鮮膜密封。

確保在每個(gè)培養(yǎng)皿上標(biāo)明其所含細(xì)菌的來(lái)源，否則您將無(wú)法分辨哪個(gè)是哪個(gè)。您可以使用一些膠帶和記號(hào)筆來(lái)完成此操作。
作為額外的預(yù)防措施，您可以將每個(gè)培養(yǎng)皿放入一個(gè)帶拉鏈的袋子中。這將提供額外的保護(hù)層，防止可能形成的任何有害細(xì)菌菌落，但仍允許您查看培養(yǎng)皿中的內(nèi)容。

將培養(yǎng)皿放在溫暖、黑暗的地方

將培養(yǎng)皿放在溫暖、黑暗的地方。 將培養(yǎng)皿放在溫暖、黑暗的地方，讓細(xì)菌在不受干擾的情況下繁殖數(shù)天。記得將盤子倒置存放，這樣細(xì)菌的生長(zhǎng)就不會(huì)受到任何水滴的干擾。

細(xì)菌生長(zhǎng)的理想溫度在 70 到 98 華氏度（20-37 攝氏度）之間。如有必要，您可以將培養(yǎng)皿放在涼爽的地方，但細(xì)菌的生長(zhǎng)速度會(huì)慢很多。
讓細(xì)菌發(fā)育 4-6 天，因?yàn)檫@將為培養(yǎng)物提供足夠的生長(zhǎng)時(shí)間。一旦細(xì)菌開始生長(zhǎng)，您可能會(huì)注意到盤子里散發(fā)出一股氣味。

記錄你的結(jié)果

記錄你的結(jié)果。 幾天后，您會(huì)發(fā)現(xiàn)每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)都生長(zhǎng)著數(shù)量驚人的細(xì)菌、霉菌和真菌。

用筆記本記錄你對(duì)每道菜內(nèi)容的觀察，或許可以得出關(guān)于哪些地方細(xì)菌最多的結(jié)論。
如果愿意，您可以使用氈尖標(biāo)記在培養(yǎng)皿底部的每個(gè)菌落周圍畫一個(gè)圓圈，從而測(cè)量細(xì)菌菌落的每日生長(zhǎng)情況。幾天后，您應(yīng)該在每個(gè)盤子的底部都有一系列同心環(huán)。這將幫助您計(jì)算和記錄數(shù)據(jù)。

測(cè)試抗菌劑的有效性

測(cè)試抗菌劑的有效性。 這個(gè)實(shí)驗(yàn)的一個(gè)有趣的變化是在培養(yǎng)皿中加入抗菌劑（洗手液、肥皂等）以測(cè)試其有效性。

將細(xì)菌引入培養(yǎng)皿后，用棉簽將一小滴洗手液、消毒皂或家用漂白劑滴到細(xì)菌樣本的中心，然后照常繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。
隨著培養(yǎng)皿中細(xì)菌的生長(zhǎng)，您應(yīng)該會(huì)在放置抗菌劑的位置周圍看到?jīng)]有細(xì)菌生長(zhǎng)的環(huán)或“光環(huán)”。這被稱為“殺傷區(qū)”（或更準(zhǔn)確地說(shuō)，“抑制區(qū)”）。
您可以通過(guò)比較每個(gè)培養(yǎng)皿中殺滅區(qū)的大小來(lái)衡量不同抗菌劑的有效性。殺滅區(qū)越寬，抗菌劑越有效。

三、安全處理細(xì)菌

采取適當(dāng)?shù)陌踩A(yù)防措施

采取適當(dāng)?shù)陌踩A(yù)防措施。 在您嘗試處理您的培養(yǎng)皿之前，您首先需要采取適當(dāng)?shù)陌踩A(yù)防措施。

雖然您培養(yǎng)的大多數(shù)細(xì)菌都不會(huì)造成危害，但大的細(xì)菌菌落可能會(huì)帶來(lái)更大的風(fēng)險(xiǎn) - 因此您需要在使用家用漂白劑處理前殺死它們。
戴上橡膠手套保護(hù)您的手免受漂白劑的傷害，戴上塑料護(hù)目鏡保護(hù)您的眼睛，并戴上圍裙保護(hù)您的衣服。
用橡膠手套蓋住切開的傷口，避免在細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)攝入或吸入細(xì)菌。

將漂白劑倒入培養(yǎng)皿中