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什么是細(xì)胞培養(yǎng)?

來源: | 發(fā)布日期:2023-10-31 | 瀏覽量:1

細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物或植物細(xì)胞在人工受控環(huán)境中的生長(zhǎng)。細(xì)胞要么直接從生物體中取出并在培養(yǎng)前分解,要么從先前建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株中取出。

某些培養(yǎng)條件取決于細(xì)胞類型,但是,每種培養(yǎng)物都必須包含合適的容器和基質(zhì)或培養(yǎng)基,為培養(yǎng)細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物(例如氨基酸、碳水化合物、維生素、礦物質(zhì))、生長(zhǎng)因子或必需激素。氣體(O2、CO2)、理化環(huán)境(pH、滲透壓、溫度)在人工環(huán)境中調(diào)節(jié)細(xì)胞的正常生長(zhǎng)也發(fā)揮著重要作用。

細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用

是分子和細(xì)胞生物學(xué)中主要的一致且可重復(fù)的工具。

有助于研究正常細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、細(xì)胞生物化學(xué)、新陳代謝、突變、疾病和復(fù)合效應(yīng)。

是疾病和藥物篩選的模型系統(tǒng)。

基本細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的具體設(shè)備取決于所進(jìn)行的研究類型,但是所有細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室都有相同的共同目標(biāo):沒有病原微生物。

下面的擴(kuò)展列表對(duì)應(yīng)了大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備和用品,使工作更加高效和準(zhǔn)確。

細(xì)胞培養(yǎng) - 70%乙醇防腐劑 - 細(xì)胞培養(yǎng)箱
- 吸氣泵 - 離心機(jī)
- 高壓滅菌器 - 冰箱冰柜
- 細(xì)胞計(jì)數(shù)器 - 手套
- 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 - 培養(yǎng)基、血清、細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑
- 細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)培養(yǎng)皿 - 各種容量的移液器
- 各種尺寸的細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)管 - 血清移液管
- 細(xì)胞培養(yǎng)罩 - 無菌過濾器
- 細(xì)胞培養(yǎng)微孔板 - 廢物容器

*請(qǐng)注意:具體的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備取決于細(xì)胞類型和研究目的

細(xì)胞培養(yǎng)安全

在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室工作與不同的風(fēng)險(xiǎn)因素和危害有關(guān),例如毒素或誘變?cè)噭?。人?動(dòng)物材料可能含有病毒和其他危險(xiǎn)的生物制劑。因此,在操作人類/動(dòng)物材料時(shí),遵循實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐的一般安全指南非常重要。

1. 進(jìn)入和離開實(shí)驗(yàn)室前要洗手。

2. 穿戴安全服(手套、封閉鞋、實(shí)驗(yàn)服)。

3、不飲食、不吸煙。

4. 不產(chǎn)生氣溶膠或產(chǎn)生很少的氣溶膠。

5. 實(shí)驗(yàn)前后對(duì)所有表面進(jìn)行凈化。

6. 按照設(shè)施指南工作。

7. 以適當(dāng)?shù)姆绞教幹盟袕U物。

8. 僅限授權(quán)人員進(jìn)入。

9.避免使用鋒利的物體。

10. 始終為所有樣品貼上清晰的標(biāo)簽。

11. 向安全官員報(bào)告所有事件。

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所需的無菌技術(shù)

為了在細(xì)胞培養(yǎng)中取得成功,必須保持無污染的環(huán)境(細(xì)菌、真菌等)。無菌技術(shù)可確保沒有微生物進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)物。通過一系列程序確保細(xì)胞培養(yǎng)無菌。

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要無菌技術(shù)

處理 試劑/介質(zhì) 職場(chǎng)
緩慢/小心處理。 所有試劑/設(shè)備的預(yù)滅菌 細(xì)胞培養(yǎng)罩工作正常
開始前對(duì)所有物品進(jìn)行消毒。 試劑無污染(有效期、外觀正常)。 經(jīng)常凈化(抽油煙機(jī)、冰箱等)
無菌移液器   工作區(qū)域:無菌、整潔
禁止將無菌物品接觸未滅菌的表面    



細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境

細(xì)胞培養(yǎng)是一種神奇的工具,可以輕松控制和操作所有理化和生理細(xì)胞因素,例如溫度、滲透壓、pH、氣體、激素和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境。

媒體 酸堿度 溫度 二氧化碳
含有營(yíng)養(yǎng)素、生長(zhǎng)因子和激素 哺乳動(dòng)物細(xì)胞的平均 pH 值為 7.4 取決于宿主的體溫 受媒體控制
生長(zhǎng)血清源、tipids、激素   哺乳動(dòng)物細(xì)胞系 36-37°C 有機(jī)或 CO2 碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)很受歡迎
    插入細(xì)胞系 27-30°C 會(huì)影響 pH 值
      4-10% C02 最常見


細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基補(bǔ)充劑

培養(yǎng)基補(bǔ)充劑有助于根據(jù)所選組織或細(xì)胞類型優(yōu)化特定應(yīng)用的細(xì)胞生長(zhǎng)。使用生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子等培養(yǎng)基補(bǔ)充劑的優(yōu)點(diǎn)是它們可以改善細(xì)胞活力和生長(zhǎng),并使細(xì)胞更長(zhǎng)時(shí)間地保持健康。例如,成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (FGF) 在體內(nèi)和體外的多種生物學(xué)功能中發(fā)揮著重要作用,并且可以在周末維持細(xì)胞培養(yǎng),因?yàn)?Proteintech 耐熱 FGF (HZ-1285) 不需要每天更換培養(yǎng)基。

細(xì)胞培養(yǎng) FGFbasic-TS 和 FGF basic(源自大腸桿菌)在 37°C 下無異源、化學(xué)成分確定的細(xì)胞培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性。連續(xù) 3 天每天通過 ELISA 測(cè)定蛋白質(zhì)濃度。37°C 孵育一天后,檢測(cè)不到 FGF basic,而第 1、2 和 3 天時(shí) FGFbasic-TS 的濃度分別為起始濃度的 60%、35% 和 20%。

生長(zhǎng)因子對(duì)于維持體外培養(yǎng)物的生長(zhǎng)起著至關(guān)重要的作用。 根據(jù)環(huán)境的不同,某些細(xì)胞可以產(chǎn)生多種譜系特異性的細(xì)胞類型。