哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)至關(guān)重要的工具，通常是細(xì)胞生物學(xué)家研究工作流程中的初始階段。 無論是科學(xué)家自己進(jìn)行培養(yǎng)還是依靠共享資源實(shí)驗(yàn)室，幾十年來，細(xì)胞培養(yǎng)的基本面基本面一直保持不變。 細(xì)胞在合成培養(yǎng)基中生長，該培養(yǎng)基可為細(xì)胞提供其營養(yǎng)需求。 這些要求至少是氨基酸，維生素，鹽和葡萄糖等能源等組件。 但是，為了支持生長，細(xì)胞需要?jiǎng)游镅寤蚱涞刃铩?血清具有1,000多種不同的成分，包括蛋白質(zhì)，脂質(zhì)，碳水化合物，生長因子，酶和其他仍然不確定的成分。 血清具有調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透性的功能，并充當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞的營養(yǎng)和其他分子的載體。 盡管可以使用有效的無血清培養(yǎng)基，但含有動(dòng)物血清的培養(yǎng)基用于生命科學(xué)中的大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用。 在這里，我們討論為研究選擇血清時(shí)要考慮的關(guān)鍵因素，以確保您獲得準(zhǔn)確，一致的結(jié)果。

血清的成分

動(dòng)物血清是細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基中的標(biāo)準(zhǔn)成分，但血清本身只是標(biāo)準(zhǔn)或一致的。

血清從批量到批量差異很大，“均勻”細(xì)胞群可能對這些變化極為敏感。 從一個(gè)實(shí)驗(yàn)到下一個(gè)實(shí)驗(yàn)使用的大量血清之間的差異會(huì)影響研究結(jié)果。 諸如激素，尿酸，尿素，膽紅素，肌酸和膽固醇之類的成分都是高度變化的，對細(xì)胞的后果（例如生長速率變化或不需要分化）的后果。

選擇從樣品開始

在為細(xì)胞文化項(xiàng)目選擇血清時(shí)，該過程中最重要的部分是測試多個(gè)批次，并在整個(gè)項(xiàng)目中選擇一個(gè)要使用的批次，包括其他機(jī)構(gòu)的任何合作者可以匯總或比較其結(jié)果。

艾莉森·基利亞（Alison Killilea）負(fù)責(zé)加州大學(xué)伯克利分校的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)施。 她說，該設(shè)施每年都要求四個(gè)不同供應(yīng)商的樣品。 “我們測試了這些血清的三到四個(gè)不同細(xì)胞系的生長，確保我們選擇一條主要的細(xì)胞系，轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系和293T細(xì)胞，這是通常用于轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的系?！?不同的胎牛血清（FBS）通過生長三個(gè)不同的細(xì)胞系來測試三個(gè)星期，以確定當(dāng)所有血清都以相同的密度鋪路時(shí)，哪種血清會(huì)產(chǎn)生最一致的細(xì)胞數(shù)量。

除了確定所測試的特定細(xì)胞最有反應(yīng)的血清外，重要的是要從整個(gè)項(xiàng)目中購買足夠的血清。 對于大型研究小組，這可能是一個(gè)挑戰(zhàn)。 

一些制造商提供了匹配的服務(wù)，因此可以購買具有相似性能和屬性的新批次以更換以前的批次。

質(zhì)量高度可變

制造過程中的許多因素有助于血清產(chǎn)品的質(zhì)量。 總部位于以色列的生物行業(yè)科學(xué)事務(wù)副總裁戴維·菲奧倫蒂尼（David Fiorentini）表示，他的公司進(jìn)行了廣泛的質(zhì)量控制測試，并根據(jù)原籍國區(qū)分了其血清。 “在以色列的主要設(shè)施中過濾的所有FBS均由歐洲藥品質(zhì)量（EDQM）的局認(rèn)證。 所有血清均在CGMP符合CGMP的設(shè)施中進(jìn)行處理。

生物產(chǎn)業(yè)以多種方式監(jiān)視血清的質(zhì)量。 公司僅從批準(zhǔn)的供應(yīng)商那里購買原材料，并遵守這些材料的書面規(guī)格。 血清在干凈的房間中加工。 每個(gè)生產(chǎn)地塊都是完全可追溯的，QC測試了物理，化學(xué)和生物學(xué)性能以及不育和不定期試驗(yàn)測試。

在MTI Globalstem，QC過程的重要部分是在研究人員使用的各種不同細(xì)胞類型上測試血清批次。 “對于我們的干細(xì)胞客戶來說，這確實(shí)是擁有可以養(yǎng)活細(xì)胞并使其在文化中增長而不會(huì)區(qū)分的血清的重點(diǎn)，” MTI Globalstem營銷總監(jiān)Donna Trollinger說。

研究人員還應(yīng)注意血清的原籍國，并確保血清驗(yàn)證是否沒有分枝桿菌和病毒。 原籍國很重要，因?yàn)槊總€(gè)國家都有自己的監(jiān)管機(jī)構(gòu)，批準(zhǔn)其他血清原籍國。 例如，一些原籍國已獲得歐盟的批準(zhǔn)，但未獲得美國農(nóng)業(yè)部的批準(zhǔn)。

加工

血清可以通過熱滅活，伽馬射線，透析和其他方法來處理其特定應(yīng)用的特性。 加熱血清量是一種常見的過程，用于滅活化補(bǔ)體的蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)會(huì)干擾測定。 但是，熱處理也可能使系統(tǒng)的其他未定義組件失活，因此，除非需要您的特定應(yīng)用，否則避免熱滅活的血清是一個(gè)好主意。

“熱滅活始于1970年代，直到現(xiàn)代過濾系統(tǒng)使其過時(shí)。 但是有些人仍然使用這些舊方案并在不知不覺中影響細(xì)胞生長速度，因?yàn)闇缁饡?huì)破壞生長因素。”

伽瑪輻照是血清中使用的另一種常見治療方法。 伽瑪照射的主要目的是使病毒失活。 透析一些FBS以去除低分子量成分，或通過色譜處理以去除IgG。

在為細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用選擇血清時(shí)，研究人員的任務(wù)具有挑戰(zhàn)性。 有許多因素需要考慮，以及對各種制造商和批次的樣品進(jìn)行勞動(dòng)密集型測試。 此外，他們必須考慮針對其應(yīng)用，原產(chǎn)國和成本的特殊處理需求。 Thermo Fisher Scientific的全球研究血清全球營銷發(fā)展經(jīng)理Chris Scanlon說，研究人員在為研究選擇血清時(shí)傾向于被誤導(dǎo)，“當(dāng)還有許多其他元素更好的元素時(shí)，他們過于重視起源作為質(zhì)量標(biāo)記 定義血清質(zhì)量（即生長，克隆，電鍍）。 他還建議利用其FBS專家團(tuán)隊(duì)直接與客戶合作，以找到合適的血清以滿足他們的研究和預(yù)算需求?！?

最后，選擇適當(dāng)?shù)难逡栽诩?xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中使用，需要對各種樣品進(jìn)行動(dòng)手測試，以查看細(xì)胞的反應(yīng)。 它還需要對文獻(xiàn)進(jìn)行一些掃描才能了解生長細(xì)胞類型的最佳條件（尤其是如果細(xì)胞系對您來說是新的），并確定細(xì)胞是否需要特定的血清類型或變異。 最后，預(yù)期使用的計(jì)劃可能是至關(guān)重要的，尤其是在進(jìn)行大規(guī)?；蜷L期實(shí)驗(yàn)的情況下。